1、原理

分光光度法分析的原理是利用物質(zhì)對不同波長的光呈現(xiàn)選擇性吸收現(xiàn)象來進行物質(zhì)的定性和定量分析。本儀器根據(jù)相對測量原理先設(shè)定參比樣品（溶劑、蒸餾水、空氣等）的透射比為100％。再測量待測樣品的透射比，從而達到分析的目的。測得的透射比與待測樣品的濃度之間關(guān)系，在一定范圍內(nèi)符合郎伯－比耳定律。

A=KCL=-logI/I0

T=I/I0

其中：T透射比（透過率）

           A 吸光度

           C 溶液的濃度

           K 溶液的吸收系數(shù)

           L 溶液的光徑長度

           I 透射光強度

           I0 入射光強度特點

72、75系列分光光度計是一款結(jié)合現(xiàn)代精密光學和微電子等高新技術(shù)，研制開發(fā)的新穎的分光光度計，它具有以下特點：

采用低雜散光，高分辨率的光柵型單光束光路結(jié)構(gòu)，儀器具有良好的穩(wěn)定性，重現(xiàn)性，光度線性和的測量讀數(shù)。更小的光譜帶寬可滿足常規(guī)分析測試項目的要求。

采用*化設(shè)計和微處理機技術(shù)，使儀器具有自動調(diào)0％T和100％T等控制功能以及T、A、C、F等測試方式（721型無C、F測試方式）。

數(shù)字顯示器可明亮清晰地顯示透射比、吸光度和濃度等參數(shù)，提高了儀器的讀數(shù)準確性。

儀器配有標準的RS-232雙向通訊接口（721無此接口），不僅可連接串口打印機，同時還可以連接計算機（可在Windows操作系統(tǒng)下運行SPD用戶應(yīng)用軟件），具有光度測試（T、A）、定量測試（C、F）及時時間掃描等應(yīng)用功能?？蛇M行數(shù)據(jù)采集，保存和調(diào)用。用途

可供物理學、化學、醫(yī)學、生物學、藥物學、地質(zhì)學等學科進行科學研究，是廣泛應(yīng)用于化工、藥品、生化、冶金、輕工、食品、材料、環(huán)保、醫(yī)學化驗等行業(yè)及分析行業(yè)中zui重要的質(zhì)量控制儀器之一，是常規(guī)實驗室的*儀器。

二、            儀器結(jié)構(gòu)原理和光學系統(tǒng)光學系統(tǒng)原理

儀器采用光柵型單光束結(jié)構(gòu)光路，光學系統(tǒng)原理如圖二所示，由鹵鎢燈或氚燈發(fā)出的連續(xù)輻射經(jīng)聚光鏡聚光后投向單色器入射狹縫，此狹縫正好處于聚光鏡及單色器內(nèi)準直鏡的焦平面上，因此進入單色器的復合光通過平面反射鏡及準直鏡變成平行光射向色散元件光柵，光柵將入射的復合光通過衍射作用形成按照一定順序均勻排列的連續(xù)單色光譜，此單色光譜重新回到準直鏡上。由于儀器出射狹縫設(shè)置在準直鏡的焦平面上，這樣，從光柵色散出來的單色光譜經(jīng)準直鏡聚光后成象在出射狹縫上，出射狹縫選出帶寬的單色光通過聚光鏡落在樣品在樣品室被測樣品中心，樣品吸收后透射的光射后光電池接收面。、整機原理

儀器微機的中央控制中心為CPU，并有程序存儲器（ROM）和數(shù)據(jù)存儲器（RAM）通過輸入輸出接口分別對顯示器，鹵鎢燈穩(wěn)壓電路等進行控制。其結(jié)構(gòu)原理方框圖如圖一所示。

由鍵盤輸入測量方式（T、A、C、F）和測量參數(shù)后，由CPU根據(jù)ROM設(shè)定的程序和RAM存儲的數(shù)據(jù)控制測量方式，并對儀器提供的測量訊號進行處理和控制，實現(xiàn)測量和相應(yīng)的運算。

工作原理：

通電開機后點燃電源燈，這時光源燈發(fā)出的復合光進入單色器，經(jīng)光柵色散由出射狹縫射出一束單光，經(jīng)樣品室被光電池接收并轉(zhuǎn)換為電訊號。通過放大器的放大和A/D變換后至CPU，CPU根據(jù)收到的訊號和調(diào)0％T、調(diào)100％T指令，由軟件自動控制，使訊號保持穩(wěn)定的輸出，使數(shù)顯屏上顯示100％T（或0.000A），實現(xiàn)了自動調(diào)0％T、調(diào)100％T的目的。

測量時設(shè)定測試波長，參比槽內(nèi)放入?yún)⒈葮悠?，?00％T鍵，CPU根據(jù)接收到的指令，自動調(diào)整100％T/0A。當樣品槽內(nèi)待測樣品進入光格，單色光被待測樣品吸收后投射出的單色光被光電池接收，轉(zhuǎn)換成與待測樣品透射光強度成一定比例的電訊號，在與參比樣品相同水平的狀態(tài)下，經(jīng)放大器放大和A/D變換后，由CPU控制顯示出待測樣品的透射比或吸光度。     儀器安裝

1、儀器工作環(huán)境

1）儀器的額定電壓為220V±22V，50HZ±1HZ。供電電壓不正常會使儀器無法正常工作。

2）儀器應(yīng)安裝在干燥的室內(nèi)，環(huán)境溫度為5℃～35℃（*為15℃～28℃），相對濕度不大于85％（一般控制在45％～65％）。

3）儀器應(yīng)安裝在堅固平穩(wěn)的工作臺上，且無強烈的震動或持續(xù)震動。

4）室內(nèi)無硫化氫，亞硫酸氟等腐蝕性氣體。

5）儀器應(yīng)遠離高強度磁場，電場及會產(chǎn)生高頻波的設(shè)備。

6）儀器應(yīng)避免強風的直接吹襲。

7）儀器應(yīng)避免光的直接照射。

8）儀器供電電源應(yīng)有良好的接地（具有獨立的地線）。

2、儀器安裝

1）開箱后檢查儀器是否有損壞，并根據(jù)裝箱單核對附件是否齊全。

2）確認配件無誤后，插入電源線并接通電源。

3）檢查儀器是否工作正常。

四、            儀器使用

1、開機預(yù)熱

儀器在使用前應(yīng)預(yù)熱30分鐘。

2、波長調(diào)整

轉(zhuǎn)動波長旋鈕，并觀察波長顯示窗，調(diào)整至需要的測試波長。

注意事項：轉(zhuǎn)動測試波長調(diào)滿度后，以穩(wěn)定5分鐘后進行測試為好（符合行業(yè)標準及檢定規(guī)程要求）

3、設(shè)置測試模式

按動“功能鍵”，便可切換測試模式。

4、結(jié)果打?。?21型無此功能）

在得到測試結(jié)果后按下“打印”鍵便可打印結(jié)果（需外接標準串行打印機）。

5、光源切換（適用于752、754、755B型）

因為儀器在紫外區(qū)和可見區(qū)使用不同的光源，所以需要撥動光源切換桿來手動的切換光源。建議的光源切換波長為340nm，即200nm～340nm使用氚燈，340nm～1000nm使用鹵鎢燈。

注意事項：如果光源選擇不正確，或光源切換桿不到位，將直接影響儀器的穩(wěn)定性。特殊測試要求除外

6、比色皿配對性

儀器所附的比色皿是經(jīng)過配對測試的，未經(jīng)配對處理的比色皿將影響樣品的測試精度。石英比色皿一套兩只，供紫外光譜區(qū)使用，置入樣品架時，兩只石英比色皿上標記Q或箭頭方向要一致。玻璃比色皿一套四只，供可見光譜區(qū)使用。

7、調(diào)T零（0％）

在T模式時，將遮光體置入樣品架，合上樣品室蓋，并拉動樣品架拉桿使其進入光路。然后按動“0％T”按鈕，顯示器上顯示“00.0”或“-00.0”，便完成調(diào)T零，完成調(diào)T零后，取出遮光體。

注意事項：1.測試模式應(yīng)在透射比（T）模式；

          2.如果未置入遮光體合上樣品室蓋，并使其進入光路便無法完成調(diào)T零；

          3.調(diào)T零時不要打開樣品室蓋，推拉樣品架；

          4.調(diào)T零后，如切換至吸光度測試模式，顯示器上顯示為“.EL”。

          5.如直接在吸光度（A）模式調(diào)T零，則不管顯示器上是否顯示“.EL”，均需按動“0％T”按鈕。

8、調(diào)100％T/OA

將參比樣品置入樣品架，并推拉樣品架拉桿使其進入光路。然后按動“100％T”按鈕，此時屏幕顯示“BL”延時數(shù)秒便顯示“100.0”（在T模式時）或“-.000”、“.000”（在A模式時），即自動完成調(diào)100％T/OA。

注意事項：調(diào)100％T/OA時不要打開樣品室蓋、推拉樣品架。

9、吸光度測試

1.    按動“功能鍵”，切換至透射比測試模式。

2.    調(diào)整測試波長。

3.    置入遮光體，合上樣品室蓋，并使其進入光路，按動“0％T”鍵調(diào)T零，此時儀器顯示“00.0”或“-00.0”.

4.    按動“功能鍵”，切換至吸光度測試模式。

5.    置入?yún)⒈葮悠?，按?ldquo;100％T”鍵，此時儀器顯示“BL”延時數(shù)秒后便顯示“-.000”或“.000”置入待測樣品，讀取測試數(shù)據(jù)。